Vasorin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404942
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Vasorin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Vasorin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Vasorin Anticuerpo (4G7): sc-517034
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Vasorin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404942 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
VASN codifica vasorina, una glicoproteína transmembrana de tipo I enriquecida en las células de músculo liso vascular que modula la señalización extracelular en la superficie celular. Se ha descrito que la vasorina se une a ligandos de TGF-β y los secuestra, influyendo en programas transcripcionales dependientes de SMAD que regulan la proliferación celular, la migración y la remodelación de la matriz extracelular. A través de estas interacciones, la vasorina contribuye a la homeostasis vascular y a procesos de remodelación tisular vinculados con la aterosclerosis, las respuestas a lesiones vasculares y fenotipos asociados a fibrosis. También se ha observado una expresión alterada de VASN en múltiples contextos tumorales, lo que respalda su uso en estudios de señalización del microambiente y transiciones de estado celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Vasorin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen VASN en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del VASN junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de VASN tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Vasorin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en VASN para la investigación de la señalización de Vasorin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de VASN críticos para la función de Vasorin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de VASN para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Vasorin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Vasorin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus VASN. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Vasorin (h) y el plásmido HDR Vasorin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología VASN para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana VASN definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.