Vasohibin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403526

概要

VASH1は、血管新生を促進するシグナルによって誘導され、新しい血管形成を負のフィードバック機構で制御する、内皮由来の血管新生調節因子であるバソヒビン1（vasohibin-1）をコードします。バソヒビン1は、チューブリンカルボキシペプチダーゼ活性やSVBPなどの補因子との相互作用を介して、内皮細胞の増殖・遊走の調節、血管リモデリング、ならびに微小管ダイナミクスの制御に関与することが報告されています。VASH1の発現変化は、腫瘍関連血管や、病的血管新生および慢性炎症を伴う病態で報告されており、血管恒常性の研究における重要性を裏付けています。そのためVASH1は、内皮ストレス応答、組織虚血、そして血管新生の微小環境を形作る細胞外シグナル伝達を司る経路の解析で、しばしば検討対象となります。

Vasohibin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるVASH1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、VASH1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、VASH1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Vasohibin-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Vasohibin-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、VASH1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Vasohibin-1の機能に不可欠なVASH1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、VASH1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Vasohibin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびVasohibin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、VASH1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Vasohibin-1 HDRプラスミド（h）および Vasohibin-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVASH1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVASH1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。