USP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432127

概要

Usp22 は脱ユビキチン化酵素 USP22 をコードしており、USP22 は転写共役因子複合体 SAGA の触媒成分として、ヒストン H2B などの基質からユビキチンを除去することでクロマチンのアクセス性や遺伝子発現プログラムに影響を与えます。転写伸長、細胞周期進行、DNA 損傷応答の制御を通じて、USP22 は増殖・分化・ゲノム完全性の維持の協調に寄与します。USP22 の活性はエピジェネティック制御経路およびユビキチン依存的なプロテオスタシスと交差し、がんに関連する転写状態でしばしば改変される、状況依存的なシグナル出力を形作ります。USP22 に関連する遺伝子発現シグネチャの破綻は、腫瘍の高い悪性度や幹細胞様表現型と関連づけられており、がん性転写やエピジェネティック可塑性の機構研究における有用性を支持します。

USP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるUsp22遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Usp22内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Usp22のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、USP22タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、USP22シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Usp22欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• USP22の機能に不可欠なUsp22エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Usp22ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• USP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびUSP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Usp22遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  USP22 HDRプラスミド（m）および USP22 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUsp22ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUsp22標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。