Plásmido Doble Nickase (h) USP21: sc-404690-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)USP21 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa USP21 (h) y el plásmido de doble nickasa USP21 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a USP21. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: USP21 Anticuerpo (B-9): sc-515911
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) USP21 | sc-404690-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) USP21 | sc-404690-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El USP21 humano codifica una enzima desubiquitinante de la familia de las proteasas específicas de ubiquitina que elimina cadenas de ubiquitina de sustratos proteicos para modular su estabilidad, localización y la salida de señalización. La actividad de USP21 interactúa con el control dependiente de ubiquitina de la señalización inmunitaria innata, la regulación transcripcional y la proteostasis, e influye en la amplitud y la duración de las vías mediante desubiquitinación reversible. Al modelar la dinámica de la ubiquitina, USP21 puede afectar decisiones del estado celular como las respuestas inflamatorias y la adaptación al estrés, procesos que con frecuencia se alteran en el cáncer y en patologías asociadas al sistema inmunitario. La expresión o actividad desregulada de USP21 se ha vinculado con señalización aberrante y regulación asociada a la cromatina, lo que lo convierte en un objetivo relevante para estudios mecanísticos de las vías de ubiquitina.
USP21 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus USP21 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de USP21. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de USP21. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con USP21 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.