USP12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406586

Visão geral

USP12 (peptidase específica de ubiquitina 12) é uma enzima desubiquitinante que regula a estabilidade proteica e a sinalização ao remover cadeias de ubiquitina de substratos selecionados. Ela atua no controle dependente de ubiquitina da homeostase celular, influenciando processos como o tráfego de receptores, respostas ao estresse e a proteostase por meio da modulação da dinâmica do sistema ubiquitina–proteassoma. A atividade de USP12 tem sido associada à regulação de nós-chave de sinalização, incluindo vias relacionadas à AKT e à sinalização do receptor de andrógeno, conectando-a ao controle dependente do contexto da proliferação e de programas transcricionais. A desregulação da expressão ou da função de USP12 tem sido associada à biologia tumoral e a outros distúrbios nos quais a edição alterada de ubiquitina perturba a amplitude da sinalização e a renovação de proteínas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO USP12 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene USP12 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do USP12, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do USP12 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína USP12.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de USP12 para a investigação da sinalização de USP12, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) USP12 críticos para a função USP12
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos USP12 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo USP12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo USP12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus USP12. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo USP12 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR USP12 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia USP12 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo USP12 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.