USP12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406586

概要

USP12（ユビキチン特異的ペプチダーゼ12）は、特定の基質からユビキチン鎖を除去することで、タンパク質の安定性やシグナル伝達を制御する脱ユビキチン化酵素である。ユビキチン依存的な細胞恒常性の制御に関与し、ユビキチン–プロテアソーム系の動態を調節することで、受容体のトラフィッキング、ストレス応答、プロテオスタシスなどの過程に影響を及ぼす。USP12の活性は、AKTやアンドロゲン受容体シグナルに関連する経路を含む主要なシグナル制御点の調節と結び付けられており、状況依存的な増殖制御や転写プログラムの制御に関与することが示されている。USP12の発現または機能の異常は、腫瘍生物学をはじめ、ユビキチン編集の変化によってシグナル強度やタンパク質代謝回転が攪乱される各種疾患と関連している。

USP12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるUSP12遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、USP12内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、USP12のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、USP12タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、USP12シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、USP12欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• USP12の機能に不可欠なUSP12エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、USP12ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• USP12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびUSP12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、USP12遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  USP12 HDRプラスミド（h）および USP12 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUSP12ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUSP12標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。