urocortin III CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406580

概要

UCN3は、コルチコトロピン放出因子（CRF）ファミリーに属する分泌性神経ペプチドであるウロコルチンIIIをコードしており、主としてCRHR2を介してシグナルを伝達し、cAMP/PKA依存的な転写プログラムを調節します。神経系および末梢組織において、ウロコルチンIIIはストレス適応生理、エネルギーバランス、自律神経出力の制御に寄与し、神経内分泌シグナルを代謝および心血管の恒常性へと結び付けます。UCN3によって影響を受けるCRHR2経路活性は、ストレス関連表現型、糖代謝（グルコース処理）、血管機能などの文脈で研究されており、UCN3はペプチドホルモンシグナル伝達や受容体選択的なCRFファミリー生物学を解析するうえで有用な結節点となります。UCN3/CRHR2シグナル伝達の動態変化は、実験モデルにおける神経内分泌および代謝の調節異常と関連づけられており、疾患機序研究における重要性が示唆されています。

urocortin III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるUCN3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、UCN3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、UCN3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、urocortin IIIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、urocortin IIIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、UCN3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• urocortin IIIの機能に不可欠なUCN3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、UCN3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• urocortin III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびurocortin III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、UCN3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  urocortin III HDRプラスミド（h）および urocortin III HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUCN3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUCN3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。