UQCRC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423625

概要

Uqcrc1は、ユビキノール‐シトクロムc還元酵素コアタンパク質1（UQCRC1）をコードしており、これはミトコンドリア呼吸鎖複合体III（シトクロムbc1）の必須の構造要素です。UQCRC1は、ユビキノールからシトクロムcへの電子伝達を担い、酸化的リン酸化の維持を助けます。ミトコンドリア膜電位、ATP産生、ならびに活性酸素種（ROS）の恒常性に影響を及ぼすことで、UQCRC1は細胞のエネルギー代謝とレドックスシグナル伝達プログラムに寄与します。複合体III機能の攪乱は、代謝適応やストレス応答を破綻させ得ますが、これらの過程は神経変性、心代謝表現型、増殖性疾患の生物学を扱うモデルでしばしば検証されています。複合体IIIのコアサブユニットとして、UQCRC1は、ミトコンドリア機能障害がアポトーシス感受性の変化、低酸素シグナル、ならびに統合的な細胞バイオエネルゲティクスに結びつく経路の研究で一般的に取り上げられます。

UQCRC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるUqcrc1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Uqcrc1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Uqcrc1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UQCRC1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UQCRC1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Uqcrc1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UQCRC1の機能に不可欠なUqcrc1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Uqcrc1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UQCRC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびUQCRC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Uqcrc1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UQCRC1 HDRプラスミド（m）および UQCRC1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUqcrc1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUqcrc1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。