Date published: 2026-7-10

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UBE2J1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-405892

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • UBE2J1 CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(h) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在UBE2J1基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:UBE2J1: sc-377002,通过WB, IF或者IHC分析
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    UBE2J1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h)

    sc-405892
    20 µg
    $397.00

    概述

    UBE2J1 编码一种锚定于内质网(ER)的 E2 泛素偶联酶,可与 E3 连接酶协同作用,对错误折叠或受调控的底物进行泛素化,从而将其导向蛋白酶体降解。该蛋白参与内质网相关降解(ERAD),将蛋白质质量控制与泛素–蛋白酶体系统的活性相连接,并在细胞应激过程中维持内质网稳态。通过调控蛋白质稳态(proteostasis),UBE2J1 影响与未折叠蛋白反应(UPR)信号、分泌蛋白成熟以及膜相关蛋白周转相关的通路。包括 UBE2J1 在内的 ERAD 组分失调,与以蛋白毒性应激和泛素介导的蛋白质周转异常为特征的疾病研究密切相关。

    UBE2J1 CRISPR/Cas9 KO质粒(h)是一组旨在针对性地破坏human细胞系中UBE2J1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对UBE2J1基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏UBE2J1开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使UBE2J1蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建UBE2J1缺失的细胞模型,用于UBE2J1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 UBE2J1 功能至关重要的 UBE2J1 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 UBE2J1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 UBE2J1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 UBE2J1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 UBE2J1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 UBE2J1 HDR 质粒(h)编码的 HDR 供体构建体以及 UBE2J1 HDR质粒(h2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由UBE2J1同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定UBE2J1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。