Plásmido Doble Nickase (h) UBE2G2: sc-404851-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)UBE2G2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa UBE2G2 (h) y el plásmido de doble nickasa UBE2G2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a UBE2G2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: UBE2G2 Anticuerpo (D-4): sc-393780
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) UBE2G2 | sc-404851-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) UBE2G2 | sc-404851-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBE2G2 codifica una enzima E2 conjugadora de ubiquitina que colabora con ligasas E3 para ensamblar cadenas de ubiquitina y regular el recambio proteico dependiente del proteasoma. Es un componente clave de la degradación asociada al retículo endoplásmico (ERAD), ya que favorece la eliminación de proteínas mal plegadas o excedentes y mantiene la proteostasis bajo estrés celular. Mediante el control dependiente de la ubiquitinación de la estabilidad de los sustratos, UBE2G2 influye en vías relacionadas con la respuesta a proteínas mal plegadas, la regulación del ciclo celular y la amplitud de las señales de transducción. La desregulación de la actividad del sistema ubiquitina–proteasoma y de ERAD se ha vinculado con la biología del cáncer, la neurodegeneración y alteraciones de la señalización inmunitaria, lo que convierte a UBE2G2 en un nodo útil para estudios mecanísticos del control de calidad proteico.
UBE2G2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus UBE2G2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de UBE2G2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de UBE2G2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con UBE2G2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.