TUSC3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-405571-LAC

TUSC3 (Tumorsuppressor-Kandidat 3) kodiert eine im endoplasmatischen Retikulum lokalisierte Untereinheit des Oligosaccharyltransferase(OST)-Komplexes, der die N‑Glykosylierung und die Qualitätskontrolle der Proteinfaltung unterstützt. Über seine Rolle bei der co-translationalen Übertragung von Glykanen beeinflusst TUSC3 die Proteostase, ER‑Stressantworten sowie die Reifung von Membran- und sezernierten Proteinen, die in Signal- und Adhäsionswege einfließen. Eine veränderte Expression oder Funktion von TUSC3 wurde mit einer gestörten Homöostase von Glykoproteinen in Verbindung gebracht und in Kontexten wie der Krebsbiologie sowie neurodevelopmentalen Phänotypen, etwa intellektueller Behinderung, untersucht. Diese Eigenschaften machen TUSC3 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung ER‑assoziierter Prozessierung, glykoproteinabhängiger Signalgebung und Stressadaptationsmechanismen in menschlichen Zellen.

TUSC3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TUSC3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TUSC3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TUSC3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TUSC3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TUSC3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.