TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400458

概要

NKX2-1（TTF-1、thyroid transcription factor 1）は、ホメオボックス型のDNA結合転写因子をコードしており、発生期および成体の甲状腺、肺上皮、腹側前脳において系譜（リネージュ）プログラムを確立・維持します。上皮分化、サーファクタント恒常性、器官形成を制御する遺伝子ネットワークを調節し、Wnt、BMP、FGFなどの発生シグナル経路と交差する転写状態を統合して制御します。ヒト疾患の観点では、NKX2-1の発現量（遺伝子量）の変化や変異が先天性の脳‐肺‐甲状腺の表現型と関連し、肺および甲状腺の病態において状況依存的な転写ネットワーク再編にも寄与します。NKX2-1は細胞同一性のマスター制御因子として機能するため、分化モデル、上皮状態遷移、腫瘍におけるリネージュ依存性の機構研究で頻繁に解析されています。

TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNKX2-1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NKX2-1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NKX2-1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NKX2-1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1の機能に不可欠なNKX2-1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NKX2-1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NKX2-1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 HDRプラスミド（h）および TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNKX2-1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNKX2-1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。