TTC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426212

概要

マウスTtc1は、テトラトリコペプチドリピート（TPR）ドメインタンパク質1（TTC1）をコードしており、TPRを含む足場タンパク質として、複数タンパク質複合体のフォールディングやトラフィッキングを調整するタンパク質間相互作用に関与するとされています。TTC1は、シャペロン関連過程や、細胞ストレス応答、プロテオスタシス、ならびに細胞骨格やオルガネラの構築に影響するシグナル伝達の要所（シグナルノード）の制御と関連づけられてきました。これらの役割を通じて、TTC1は主要な制御因子の安定性や集合（アセンブリ）を形作ることで、細胞周期の進行や分化プログラムに影響を及ぼし得ます。プロテオスタシスやシグナル恒常性の破綻は、神経発達・神経変性の研究領域や腫瘍生物学とも広く関わるため、Ttc1は機序解明研究に有用な座位です。

TTC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTtc1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ttc1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ttc1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TTC1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TTC1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ttc1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TTC1の機能に不可欠なTtc1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ttc1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TTC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTTC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ttc1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TTC1 HDRプラスミド（m）および TTC1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTtc1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTtc1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。