Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TrxR1 Double Nickase Plasmid (h): sc-400994-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das TrxR1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- TrxR1 Double-Nickase-Plasmid (h) und TrxR1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf TXNRD1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: TrxR1: sc-28321
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
TrxR1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400994-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TrxR1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400994-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen **TXNRD1** kodiert die Thioredoxin-Reduktase 1 (TrxR1), ein zytosolisches Selenoenzym, das NADPH nutzt, um Thioredoxin zu reduzieren und die Thiol‑Disulfid-Homöostase aufrechtzuerhalten. TrxR1 unterstützt die antioxidative Abwehr und die Redoxsignalgebung, indem es Thioredoxin in reduzierter Form bereitstellt – für das Recycling von Peroxiredoxinen, die DNA-Synthese über die Ribonukleotid-Reduktase sowie die redoxabhängige Kontrolle von Transkriptionsfaktoren. Durch die Einbindung in Glutathion- und thioredoxinabhängige Signalwege beeinflusst **TXNRD1** zelluläre Antworten auf oxidativen Stress, Proteostase und Apoptose. Eine fehlregulierte TXNRD1/TrxR1-Aktivität wird häufig in Zusammenhängen wie tumoraler Redoxanpassung, Entzündung und Neurodegeneration untersucht, in denen Redoxungleichgewicht und Stresssignalgebung eine wichtige Rolle spielen.
TrxR1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des TXNRD1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von TXNRD1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die TXNRD1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit TXNRD1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.