Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TRP2/DCT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400334
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRP2/DCT O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TRP2/DCT, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRP2/DCT Anticorpo (C-9): sc-74439
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRP2/DCT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400334 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DCT codifica a dopacromo tautomerase (TRP2/DCT), uma enzima melanosomal que catalisa a conversão de dopacromo em DHICA durante a biossíntese de eumelanina. Atuando a jusante da tirosinase e em coordenação com a TYRP1, a TRP2/DCT dá suporte à melanogênese, à maturação dos melanossomas e ao equilíbrio redox em células produtoras de pigmento. Sua expressão é regulada por programas transcricionais de linhagem, como o MITF, e se integra a vias que controlam a pigmentação e as respostas ao estresse oxidativo. Alterações na atividade ou na expressão de DCT têm sido associadas a fenótipos de pigmentação e são frequentemente estudadas no contexto da biologia do melanoma e da apresentação de antígenos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRP2/DCT (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DCT em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DCT, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DCT na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRP2/DCT.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DCT para a investigação da sinalização de TRP2/DCT, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DCT críticos para a função TRP2/DCT
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DCT para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TRP2/DCT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TRP2/DCT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DCT. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TRP2/DCT Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TRP2/DCT (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DCT para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DCT definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.