Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TRMT6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412224
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRMT6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TRMT6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRMT6 Anticorpo (F-3): sc-271752
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRMT6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-412224 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O TRMT6 codifica a subunidade catalítica do complexo de metiltransferase de tRNA (adenina(58)-N1) que, em parceria com o TRMT61A, instala a modificação conservada m1A58 em tRNAs citosólicos. Essa modificação de RNA contribui para a estabilidade estrutural do tRNA, a decodificação precisa e a tradução eficiente, conectando a atividade do TRMT6 à proteostase e às respostas celulares ao estresse. A perturbação da metilação de tRNAs pode desregular programas globais de tradução e tem sido associada a alterações na proliferação e em vias de manutenção do genoma em diversos sistemas modelo. Assim, o TRMT6 é estudado no contexto da regulação epitranscritômica do RNA, do controle translacional e de mudanças relacionadas a doenças no crescimento celular e na adaptação ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRMT6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRMT6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRMT6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRMT6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRMT6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRMT6 para a investigação da sinalização de TRMT6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRMT6 críticos para a função TRMT6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRMT6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TRMT6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TRMT6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRMT6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TRMT6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TRMT6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRMT6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRMT6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.