TRIL Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406056

Descripción general

TRIL (interactor de TLR4 con repeticiones ricas en leucina) es una proteína accesoria transmembrana que modula la señalización inmunitaria innata al facilitar respuestas dependientes del receptor tipo Toll 4 (TLR4), en particular en la microglía y otros contextos de linaje mieloide. Mediante interacciones que favorecen el tráfico del receptor y la capacidad de respuesta a ligandos, TRIL influye en las vías posteriores asociadas a MyD88 y TRIF, que conducen a programas transcripcionales mediados por NF-κB e IRF. Su actividad contribuye a la regulación de la producción de citocinas e interferones, moldeando redes de señalización neuroinflamatoria e inflamatoria. La desregulación de la señalización asociada a TRIL se ha estudiado en el contexto de mecanismos inflamatorios y neuroinflamatorios relevantes para trastornos en los que están implicadas respuestas impulsadas por TLR4.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRIL (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRIL en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRIL junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRIL tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRIL.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRIL para la investigación de la señalización de TRIL, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TRIL críticos para la función de TRIL
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRIL para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TRIL CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TRIL CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRIL. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRIL (h) y el plásmido HDR TRIL (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRIL para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRIL definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.