Particules Lentivirales d'Activation (h) TREX-1: sc-403875-LAC

Le gène humain **TREX1** code **TREX-1**, une exonucléase d’ADN 3′→5′ qui dégrade l’ADN cytosolique aberrant provenant de rétroéléments endogènes, d’intermédiaires de réplication bloqués ou d’une réparation de l’ADN défectueuse. En limitant l’accumulation d’ADN immunostimulant, TREX-1 inhibe l’activation de l’axe **cGAS–STING** et la signalisation en aval des **interférons de type I**, reliant ainsi l’intégrité du génome à l’homéostasie de l’immunité innée. Une activité de TREX-1 dérégulée est associée à des phénotypes inflammatoires dépendants des interférons et à des mécanismes de maladies auto-immunes, et une clairance de l’ADN altérée peut également influencer les réponses au stress réplicatif ainsi que les interactions tumeur–système immunitaire. TREX1 est donc largement étudié dans les voies qui régissent le métabolisme de l’ADN, la détection des acides nucléiques et la signalisation inflammatoire dans les types cellulaires pertinents.

Les particules d'activation lentivirales TREX-1 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de TREX1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales TREX-1 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription TREX1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de TREX-1. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif TREX1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.