TRAF7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404992

概要

TRAF7は、TNF受容体関連因子（TRAF）ファミリーに属するE3ユビキチンリガーゼ兼アダプタータンパク質をコードしており、受容体近傍のシグナル伝達と、ユビキチン依存的なタンパク質安定性の制御を統合します。TRAF7はMAPKおよびNF-κBシグナル伝達を含む複数のストレス・炎症経路を調節し、主要なシグナル分子のユビキチン化を介して、アポトーシス、細胞骨格の構築、細胞極性にも影響を及ぼします。TRAF7活性の異常や反復性のTRAF7変異は複数の腫瘍で報告されており、がん促進性シグナル伝達、転写制御、ならびに微小環境応答における役割が示唆されています。経路上の結節点として、TRAF7はプロテオスタシス、シグナル伝達、文脈依存的な増殖制御の研究でしばしば取り上げられます。

TRAF7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTRAF7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TRAF7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TRAF7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRAF7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRAF7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TRAF7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRAF7の機能に不可欠なTRAF7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TRAF7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRAF7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTRAF7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TRAF7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRAF7 HDRプラスミド（h）および TRAF7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTRAF7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTRAF7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。