TRAF6 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423497

개요

마우스 Traf6는 E3 유비퀴틴 리가아제이자 어댑터 단백질인 TRAF6를 암호화하며, TNF 수용체 슈퍼패밀리 구성원과 Toll-like/IL-1 수용체 하위 신호를 통합해 선천 및 적응 면역 반응을 조절합니다. TRAF6는 K63-연결 유비퀴틴화 반응을 촉매하여 TAK1 및 IKK 복합체의 조립을 촉진하고, 그 결과 NF-κB와 MAPK 신호전달 및 염증, 세포 생존, 분화를 조절하는 전사 프로그램을 유도합니다. 또한 파골세포 형성(osteoclastogenesis)에서 RANK/RANKL 신호전달의 핵심 요소이며, 유비퀴틴 의존적 스캐폴딩을 통해 자가포식 조절에도 기여합니다. TRAF6 신호가 이상 조절될 경우 염증성 병리, 골 리모델링 결함, 그리고 NF-κB/MAPK 활성화 및 유비퀴틴 경로 재배선이 두드러지는 종양성 신호 환경과 연관되는 것으로 보고되어 왔습니다.

TRAF6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Traf6 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Traf6 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Traf6의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TRAF6 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TRAF6 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Traf6 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TRAF6 기능에 중요한 Traf6 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Traf6 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TRAF6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TRAF6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Traf6 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TRAF6 HDR 플라스미드 (m) 및 TRAF6 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Traf6 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Traf6 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.