Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Topo IIIβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406840
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Topo IIIβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Topo IIIβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Topo IIIβ-1 Anticorpo (B-10): sc-137238
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Topo IIIβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406840 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TOP3B codifica a DNA topoisomerase III beta (Topo IIIβ), uma topoisomerase do tipo IA independente de ATP que resolve o estresse topológico ao clivar e religar transitoriamente ácidos nucleicos de fita simples. A Topo IIIβ atua em vias de manutenção do genoma que protegem a replicação e a transcrição, e coopera com parceiros helicases e de ancoragem (scaffold) para limitar o acúmulo de R-loops e outras estruturas aberrantes de ácidos nucleicos. Por meio dessas atividades, TOP3B ajuda a preservar a integridade do DNA e a sustentar o metabolismo adequado de RNA, conectando a atividade de topoisomerase a processos tanto nucleares quanto citoplasmáticos. A disrupção genética ou a regulação alterada de TOP3B tem sido associada a fenótipos de instabilidade genômica e investigada no contexto da suscetibilidade a transtornos do neurodesenvolvimento e psiquiátricos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Topo IIIβ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TOP3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TOP3B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TOP3B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Topo IIIβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TOP3B para a investigação da sinalização de Topo IIIβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TOP3B críticos para a função Topo IIIβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TOP3B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Topo IIIβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Topo IIIβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TOP3B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Topo IIIβ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Topo IIIβ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TOP3B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TOP3B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.