TOB1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423508

概要

Tob1 は、抗増殖性 BTG/TOB ファミリーに属する TOB1 をコードしており、即時早期応答性の転写コレギュレーターとして機能し、細胞周期の進行を調節します。TOB1 は MAPK 依存的なリン酸化によって制御され、SMAD を介した転写プログラムと連携して、分化や増殖抑制を含む TGF-β シグナル伝達の出力を形成します。免疫細胞では、TOB1 は T 細胞の活性化やサイトカイン産生を抑制することで、活性化の閾値や免疫寛容の維持に寄与し、免疫恒常性を制御する経路と結び付いています。TOB1 活性の変化は、増殖制御の破綻や免疫関連表現型と関連することが報告されており、マウスモデルにおける発がん性シグナル、炎症、組織リモデリングの機序研究において重要です。

TOB1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTob1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tob1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tob1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TOB1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TOB1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tob1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TOB1の機能に不可欠なTob1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tob1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TOB1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTOB1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tob1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TOB1 HDRプラスミド（m）および TOB1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTob1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTob1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。