TOB1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423508
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TOB1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TOB1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TOB1 Anticuerpo (E-1): sc-133095
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TOB1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423508 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Tob1 codifica TOB1, un miembro de la familia antiproliferativa BTG/TOB que actúa como corregulador transcripcional de respuesta inmediata y modula la progresión del ciclo celular. TOB1 se regula mediante fosforilación dependiente de MAPK e interactúa con programas transcripcionales mediados por SMAD para dar forma a las salidas de la señalización de TGF-β, incluidos efectos sobre la diferenciación y la restricción del crecimiento. En células inmunitarias, TOB1 contribuye al mantenimiento de los umbrales de activación y de la tolerancia al atenuar la activación de las células T y la producción de citocinas, lo que lo vincula a vías que controlan la homeostasis inmunitaria. La actividad alterada de TOB1 se ha asociado con proliferación desregulada y fenotipos relacionados con el sistema inmunitario, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la señalización oncogénica, la inflamación y la remodelación tisular en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TOB1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tob1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tob1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tob1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TOB1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tob1 para la investigación de la señalización de TOB1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tob1 críticos para la función de TOB1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tob1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TOB1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TOB1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tob1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TOB1 (m) y el plásmido HDR TOB1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tob1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tob1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.