Tns2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411726

概要

TNS2はテンシン2（Tns2）をコードしており、Tns2はフォーカルアドヒージョンに関連する細胞骨格アダプタータンパク質として、インテグリン受容体をアクチンネットワークに連結し、細胞—細胞外マトリックス接触部位におけるシグナル伝達の編成に関与します。Tns2は複数のモジュール状ドメインを介して、接着複合体の組み立てとターンオーバーを協調的に制御し、ホスホイノシチド依存性シグナル伝達や受容体型チロシンキナーゼに連動する事象など、細胞の伸展、遊走、メカノトランスダクションに関わる経路を調節します。TNS2機能の変化は、接着シグナル伝達と組織恒常性の破綻と関連づけられており、とりわけ腎糸球体の生物学およびポドサイトの完全性との関連で重要視されています。これらの特性により、TNS2は接着駆動性のシグナル伝達、細胞骨格リモデリング、ならびに状況依存的な細胞の浸潤性や分化の変化を研究するうえで有用な結節点となります。

Tns2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTNS2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TNS2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TNS2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Tns2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Tns2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TNS2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Tns2の機能に不可欠なTNS2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TNS2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Tns2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTns2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TNS2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Tns2 HDRプラスミド（h）および Tns2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTNS2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTNS2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。