TNP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423464

概要

Tnp2は移行タンパク質2（TNP2）をコードしており、精子特異的なクロマチンリモデリング因子として、精子形成後期にヒストンを置換し、その後のプロタミン取り込みを促進してDNAを安定に高密度へ凝縮させます。本タンパク質は、ヒストンからプロタミンへの交換プログラムの協調的な進行に関与し、核の凝縮、ゲノムの完全性、ならびに精子頭部の適切な形態の維持を支えます。Tnp2の機能が破綻するとクロマチン包装の動態が乱れ、精子成熟の障害や雄性不妊の表現型につながる可能性があります。モデルとして、マウスのTNP2は、エピジェネティックな再プログラミング、減数分裂後の転写サイレンシング、そして生殖細胞におけるクロマチン構造制御の研究に広く用いられています。

TNP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTnp2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tnp2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tnp2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TNP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TNP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tnp2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TNP2の機能に不可欠なTnp2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tnp2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TNP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTNP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tnp2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TNP2 HDRプラスミド（m）および TNP2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTnp2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTnp2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。