TNFα-IP 8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411806

概要

TNFAIP8は、TNFαやその他の免疫刺激によって誘導される細胞質タンパク質TNFα-induced protein 8（TNFα-IP 8）をコードしており、細胞生存および炎症性シグナル伝達を制御します。TNFα-IP 8は、アポトーシスの調節、NF-κB関連応答、ならびに細胞増殖・遊走・免疫恒常性に影響するストレス適応プログラムの制御に関与することが示されています。TNFAIP8の発現異常は、複数の疾患状況で報告されており、とりわけがんや炎症に関連する転写シグネチャーで顕著です。そのためTNFAIP8は、サイトカイン駆動性のシグナル伝達と、細胞死抵抗性や運動性変化といった表現型を結び付ける結節点として、しばしば研究対象となっています。

TNFα-IP 8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTNFAIP8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TNFAIP8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TNFAIP8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TNFα-IP 8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TNFα-IP 8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TNFAIP8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TNFα-IP 8の機能に不可欠なTNFAIP8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TNFAIP8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TNFα-IP 8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTNFα-IP 8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TNFAIP8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TNFα-IP 8 HDRプラスミド（h）および TNFα-IP 8 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTNFAIP8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTNFAIP8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。