TNFα-IP 8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411806

Descripción general

TNFAIP8 codifica la proteína 8 inducida por TNFα (TNFα-IP 8), un regulador citoplasmático de la supervivencia celular y de la señalización inflamatoria que es inducido por TNFα y otros estímulos inmunitarios. TNFα-IP 8 se ha relacionado con la modulación de la apoptosis, las respuestas asociadas a NF-κB y programas de adaptación al estrés que influyen en la proliferación celular, la migración y la homeostasis inmunitaria. Se han descrito alteraciones en la expresión de TNFAIP8 en múltiples contextos patológicos, particularmente en firmas transcripcionales asociadas al cáncer y a la inflamación. Como resultado, TNFAIP8 se estudia con frecuencia como un nodo que conecta la señalización impulsada por citocinas con fenotipos como la resistencia a la muerte celular y cambios en la motilidad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TNFα-IP 8 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TNFAIP8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TNFAIP8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TNFAIP8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TNFα-IP 8.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TNFAIP8 para la investigación de la señalización de TNFα-IP 8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TNFAIP8 críticos para la función de TNFα-IP 8
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TNFAIP8 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TNFα-IP 8 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TNFα-IP 8 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TNFAIP8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TNFα-IP 8 (h) y el plásmido HDR TNFα-IP 8 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TNFAIP8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TNFAIP8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.