TNFα-IP 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423435

概要

Tnfaip2 は、TNFα誘導性タンパク質2（TNFα-induced protein 2：TNFα-IP 2）をコードしており、免疫活性化時の炎症シグナル伝達や細胞挙動のリモデリングに関与する、サイトカイン応答性因子として知られています。その発現は TNFα/NF-κB および関連経路の下流で誘導され、骨髄系細胞や内皮細胞の文脈において、細胞骨格ダイナミクス、膜輸送、遊走の制御との関連が示されています。マウス系では、TNFα-IP 2 は炎症促進性の転写プログラムの指標として、また自然免疫の刺激を接着や運動性の変化へとつなぐ結節点としてしばしば用いられます。TNFα-IP 2 に関連するシグナルの制御異常は、慢性炎症や腫瘍関連微小環境の生物学という観点から研究されており、臨床的転帰を示唆することなく、炎症—がんクロストークの解明に有用であることが支持されています。

TNFα-IP 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTnfaip2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tnfaip2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tnfaip2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TNFα-IP 2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TNFα-IP 2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tnfaip2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TNFα-IP 2の機能に不可欠なTnfaip2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tnfaip2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TNFα-IP 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTNFα-IP 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tnfaip2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TNFα-IP 2 HDRプラスミド（m）および TNFα-IP 2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTnfaip2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTnfaip2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。