TNFα-IP 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423434

概要

Tnfaip1（TNFα-IP 1）は、TNFαによって誘導されるタンパク質をコードしており、ストレス応答性シグナル伝達や細胞恒常性に関与すると考えられています。報告されている機能として、細胞周期の進行、DNA損傷応答、タンパク質代謝回転に影響を与える核内および細胞質内のプロセスへの関与が挙げられ、TNF/NF-κBに関連する炎症性のシグナルを下流の転写プログラムや生存プログラムへとつなぐ役割が示唆されています。マウス系では、TNFα-IP 1が、組織リモデリングや免疫微小環境を形作る増殖およびアポトーシスの文脈依存的な制御にどのように寄与するかが研究されています。これらの経路の破綻は、臨床的な転帰を示唆することなく、炎症性疾患の生物学や腫瘍関連シグナルのモデルにおいてしばしば検討されます。

TNFα-IP 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTnfaip1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tnfaip1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tnfaip1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TNFα-IP 1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TNFα-IP 1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tnfaip1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TNFα-IP 1の機能に不可欠なTnfaip1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tnfaip1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TNFα-IP 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTNFα-IP 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tnfaip1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TNFα-IP 1 HDRプラスミド（m）および TNFα-IP 1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTnfaip1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTnfaip1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。