TMPRSS11E CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412014

概要

TMPRSS11Eは、上皮表面で発現するII型膜貫通型セリンプロテアーゼをコードしており、細胞周囲でのタンパク質分解（ペリセルラー・プロテオリシス）を通じて、粘膜バリア機能、細胞間相互作用、細胞外微小環境のリモデリングを制御し得ます。TTSPファミリーの一員として、TMPRSS11Eはプロテアーゼ活性化型シグナル伝達や、上皮の分化および炎症応答を形作るプロテオリティックなプロセシング事象に影響を及ぼす立場にあります。上皮プロテアーゼ活性の異常は、気道上皮や扁平上皮の病態形成と関連づけられており、TMPRSS11Eは上皮ストレス応答や組織リモデリングの基盤機構を検討するうえで重要な標的となります。膜係留型というプロテアーゼの構造的特徴により、細胞表面における区画化されたプロテアーゼネットワークと、それが下流のシグナル伝達プログラムに及ぼす影響の解明に適しています。

TMPRSS11E CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMPRSS11E遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMPRSS11E内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMPRSS11Eのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMPRSS11Eタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMPRSS11Eシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMPRSS11E欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMPRSS11Eの機能に不可欠なTMPRSS11Eエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMPRSS11Eゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMPRSS11E CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTMPRSS11E CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMPRSS11E遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMPRSS11E HDRプラスミド（h）および TMPRSS11E HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMPRSS11Eホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMPRSS11E標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。