TMEM53 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-413194

概要

TMEM53（transmembrane protein 53）は、核膜に関連するシグナル伝達と細胞恒常性の調節に関与すると考えられている、小型の膜関連タンパク質をコードします。近年の研究により、TMEM53がBMP/SMADシグナル伝達や転写制御を担う経路と関連することが示されつつあり、細胞内のシグナル伝達と核内応答の協調に役割を果たす可能性が示唆されています。TMEM53の機能異常は、骨格および頭蓋顔面の発生の攪乱や関連する骨表現型と結び付けられており、骨芽細胞分化や発生生物学における作用機序研究の対象として注目されています。また、その発現と推定される膜局在は、オルガネラ間クロストーク、タンパク質輸送、状況依存的な経路調節の解明に向けた検討を後押しします。

TMEM53 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMEM53遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMEM53内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMEM53のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMEM53タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMEM53シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMEM53欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMEM53の機能に不可欠なTMEM53エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMEM53ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMEM53 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTMEM53 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMEM53遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMEM53 HDRプラスミド（h）および TMEM53 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMEM53ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMEM53標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。