TMEM182 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-436273

概要

Tmem182 は、複数回膜貫通型タンパク質と予測される TMEM182 をコードしており、骨格筋で発現が高く、筋分化（ミオジェニック）プログラムとの関連が示されています。分子機能は未だ完全には解明されていないものの、TMEM182 は筋の発生や再生に伴う、膜関連シグナル伝達や細胞リモデリング過程に関与すると報告されています。トランスクリプトーム研究では、代謝適応や炎症性シグナルが関わる状況で Tmem182 の制御が報告されており、筋恒常性やストレス応答を形作る経路との関連が示唆されています。発現異常は、筋関連の表現型や組織リモデリングの実験モデルで観察されており、筋骨格系生物学における機構解析の標的としての有用性が支持されています。

TMEM182 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTmem182遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tmem182内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tmem182のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMEM182タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMEM182シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tmem182欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMEM182の機能に不可欠なTmem182エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tmem182ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMEM182 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTMEM182 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tmem182遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMEM182 HDRプラスミド（m）および TMEM182 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTmem182ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTmem182標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。