TMEM132B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414044

Descripción general

TMEM132B codifica una proteína transmembrana de paso único de la familia TMEM132, enriquecida en el sistema nervioso y asociada con la organización de membranas y las interacciones célula–célula/MEC (matriz extracelular). Estudios emergentes implican a las proteínas TMEM132 en el acoplamiento al citoesqueleto y en procesos relacionados con la adhesión que influyen en el crecimiento de neuritas, la conectividad sináptica y la morfología celular. La expresión de TMEM132B y su variación genética se han explorado en contextos neurodel desarrollo y neuropsiquiátricos, lo que respalda su relevancia para investigar las vías que modelan la formación y el mantenimiento de redes neuronales. El análisis funcional de TMEM132B puede ayudar a dilucidar cómo el andamiaje transmembrana se interconecta con módulos de señalización que regulan la diferenciación neuronal y la remodelación en respuesta al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMEM132B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TMEM132B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TMEM132B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TMEM132B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMEM132B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TMEM132B para la investigación de la señalización de TMEM132B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TMEM132B críticos para la función de TMEM132B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TMEM132B para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMEM132B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TMEM132B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TMEM132B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMEM132B (h) y el plásmido HDR TMEM132B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TMEM132B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TMEM132B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.