TMED4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406737

Visão geral

TMED4 (também conhecido como p25) é um membro da família p24 de proteínas transmembrana do tipo I que atuam como receptores de carga na via secretora inicial. Participa do tráfego vesicular dependente de COPI e COPII entre o retículo endoplasmático e o aparelho de Golgi, sustentando a triagem de proteínas, o controle de qualidade e a manutenção da homeostase da via secretora. Ao influenciar a dinâmica do transporte RE–Golgi, a TMED4 pode afetar o processamento e a entrega à superfície de receptores de sinalização e de fatores secretados, ligando-a a uma regulação mais ampla da comunicação celular. A desregulação de componentes do tráfego secretor, incluindo vias associadas à TMED4, tem sido investigada em contextos como programas de crescimento oncogênico e fenótipos de adaptação ao estresse relevantes para a biologia de doenças humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TMED4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TMED4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TMED4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TMED4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TMED4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TMED4 para a investigação da sinalização de TMED4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TMED4 críticos para a função TMED4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TMED4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TMED4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TMED4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TMED4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TMED4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TMED4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TMED4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TMED4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.