TMED4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406737

概要

TMED4（p25としても知られる）は、初期分泌経路においてカーゴ受容体として機能するp24ファミリーのI型膜貫通タンパク質の一員です。小胞体（ER）とゴルジ体の間で行われるCOPIおよびCOPII依存的な小胞輸送に関与し、タンパク質の選別、品質管理、ならびに分泌経路の恒常性維持を支えます。ER–ゴルジ輸送の動態に影響を与えることで、TMED4はシグナル受容体や分泌因子のプロセシングおよび細胞表面への輸送に影響し、細胞間コミュニケーションのより広範な制御とも関連づけられます。TMED4関連経路を含む分泌輸送コンポーネントの機能異常は、がん化に伴う増殖プログラムや、ヒト疾患の生物学に関わるストレス適応表現型などの文脈で研究されています。

TMED4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMED4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMED4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMED4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMED4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMED4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMED4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMED4の機能に不可欠なTMED4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMED4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMED4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTMED4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMED4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMED4 HDRプラスミド（h）および TMED4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMED4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMED4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。