TLR7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431302

概要

Tlr7 は、一本鎖RNAおよび合成イミダゾキノリン系リガンドを検知して自然免疫シグナル伝達を開始する、エンドソーム局在型のパターン認識受容体である Toll-like receptor 7（TLR7）をコードします。活性化されると、TLR7 は MYD88 と結合し、IRAK–TRAF6 シグナル伝達を介して NF-κB および IRF7 依存的な転写を駆動し、I 型インターフェロンおよび炎症性サイトカインの発現を誘導します。これにより、抗ウイルス防御や B 細胞応答が形成されます。マウスでは、TLR7 活性が樹状細胞の活性化、胚中心の動態、ならびに獲得免疫を協調させるサイトカイン環境に影響します。TLR7 シグナルの制御破綻は炎症性および自己免疫性の表現型に関与するとされ、全身性免疫活性化や病原体認識のモデルにおいて頻繁に研究されています。

TLR7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTlr7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tlr7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tlr7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TLR7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TLR7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tlr7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TLR7の機能に不可欠なTlr7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tlr7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TLR7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTLR7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tlr7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TLR7 HDRプラスミド（m）および TLR7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTlr7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTlr7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。