TLR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-423418-KO-2

概要

Tlr1 はマウスの Toll 様受容体 1（TLR1）をコードしており、細胞表面で TLR2 と機能的なヘテロ二量体を形成して、トリアシル化細菌リポペプチドを検知するパターン認識受容体である。リガンド結合により MyD88 依存的シグナル伝達が誘導され、NF-κB および MAPK カスケードが活性化し、炎症性サイトカインやケモカインの転写を促進することで、自然免疫応答およびそれに続く獲得免疫応答の形成に寄与する。TLR1 の活性は、樹状細胞やマクロファージの活性化、バリア免疫、ならびにマイクロバイオーム内の微生物由来産物とのクロストークに影響を与える。TLR1/TLR2 シグナルの制御異常は、感染症モデルや免疫介在性疾患モデルにおいて、炎症性表現型や宿主防御の変化と関連づけられている。

TLR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるTlr1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tlr1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tlr1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TLR1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TLR1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tlr1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TLR1の機能に不可欠なTlr1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tlr1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TLR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTLR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tlr1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TLR1 HDRプラスミド（m）および TLR1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTlr1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTlr1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。