TIP30 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406742

概要

HTATIP2 は TIP30（別名 CC3）をコードしており、転写プログラムおよび細胞の恒常性の制御に関与するとされる細胞質・核内タンパク質です。TIP30 は、アポトーシスの制御、核—細胞質間輸送の調節、ならびに受容体のターンオーバーや成長因子シグナル伝達に影響するエンドサイトーシス輸送経路の制御との関連が報告されています。HTATIP2/TIP30 の発現変化は複数の腫瘍の文脈で報告されており、細胞増殖、浸潤、転移表現型との関連について研究されています。これらの特性により、TIP30 はヒト細胞におけるストレス応答、細胞内輸送、遺伝子発現制御を結び付けるシグナルネットワークを解析するうえで有用な標的となります。

TIP30 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHTATIP2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HTATIP2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HTATIP2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TIP30タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TIP30シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HTATIP2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TIP30の機能に不可欠なHTATIP2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HTATIP2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TIP30 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTIP30 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HTATIP2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TIP30 HDRプラスミド（h）および TIP30 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHTATIP2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHTATIP2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。