TIG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403443

概要

RARRES2 は、タザロテン誘導遺伝子2（TIG2）（別名 chemerin）をコードしており、TIG2 は分泌性のアディポカイン／走化性因子として、主に CMKLR1 および関連受容体を介してシグナル伝達し、白血球の遊走や組織における免疫監視を調節します。TIG2 は炎症カスケード、脂肪細胞分化、代謝恒常性に影響し、脂肪組織の生物学を自然免疫シグナルや内皮機能と結び付けます。RARRES2/TIG2 の発現異常は慢性炎症や代謝性疾患と関連することが報告されており、肥満、インスリン抵抗性、心血管病態などの文脈で研究されています。がん領域では、chemerin シグナルが腫瘍微小環境の形成や免疫細胞リクルートの調節に果たす役割が検討されています。

TIG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRARRES2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RARRES2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RARRES2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TIG2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TIG2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RARRES2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TIG2の機能に不可欠なRARRES2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RARRES2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TIG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTIG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RARRES2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TIG2 HDRプラスミド（h）および TIG2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRARRES2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRARRES2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。