TGF beta Receptor 2/TGFBR2 Double Nickase Plasmid (m): sc-423371-NIC

Das murine Gen **Tgfbr2** kodiert den **TGF‑beta‑Rezeptor 2 (TGFBR2)**, eine transmembrane Serin/Threonin‑Kinase, die TGFB‑Liganden bindet und **TGFBR1** phosphoryliert, um die kanonische **SMAD2/3‑Signalübertragung** zu initiieren. Dieser Signalweg koordiniert eine kontextabhängige Kontrolle der Zellzyklusregulation, Differenzierung, epithelial‑mesenchymalen Transition und des Umbaus der extrazellulären Matrix und integriert sich zudem mit **MAPK‑**, **PI3K‑AKT‑** und **RHO‑GTPase‑**Signalwegen. In der biomedizinischen Forschung wird eine veränderte TGFBR2‑Aktivität häufig genutzt, um eine gestörte Gewebehomöostase, Immunmodulation und fibrotisches Remodeling zu modellieren, ebenso wie die in der Krebsbiologie beobachtete Umverdrahtung von Signalwegen und Entwicklungsphänotypen. Da TGFBR2 an der Spitze der TGFB‑Signaltransduktion steht, ermöglicht die Perturbation von **Tgfbr2** einen direkten Zugang zur Analyse nachgeschalteter Transkriptionsprogramme und ligandenabhängiger Rückkopplungsschleifen.

TGF beta Receptor 2/TGFBR2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Tgfbr2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Tgfbr2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Tgfbr2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Tgfbr2-Störung.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.