TET2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400545-LAC

TET2 (ten-eleven translocation 2) ist eine Fe(II)/2‑Oxoglutarat‑abhängige Dioxygenase, die die Oxidation von 5‑Methylcytosin zu 5‑Hydroxymethylcytosin sowie zu weiteren oxidierten Derivaten katalysiert und damit aktive und passive DNA‑Demethylierung unterstützt. Durch die Prägung von CpG‑Methylierungslandschaften beeinflusst TET2 die Enhancer‑Aktivität, linienspezifische Transkriptionsprogramme und die Chromatinzugänglichkeit in hämatopoetischen und Immunzellen. Eine Störung der TET2‑abhängigen epigenetischen Regulation ist eng mit veränderter Selbsterneuerung und Differenzierung verbunden; wiederkehrende Mutationen werden bei myeloischen Malignomen und der klonalen Hämatopoese beobachtet. Diese Eigenschaften machen TET2 zu einem zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung der epigenetischen Kontrolle der Transkription, der Ausgänge inflammatorischer Signalwege und kontextabhängiger genregulatorischer Netzwerke.

TET2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TET2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TET2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TET2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TET2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TET2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.