TECPR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411378

概要

TECPR2（tectonin beta-propeller repeat containing 2）は、オートファジー関連の膜輸送およびプロテオスタシスに関与するとされる、大型の細胞質スキャフォールドタンパク質をコードします。オートファジー機構との相互作用を介して、TECPR2はカーゴの取り扱いや小胞輸送の各段階を支え、ミスフォールドタンパク質や損傷オルガネラの分解・更新に影響を与えます。これらは神経細胞の恒常性維持にとって中心的な過程です。TECPR2の遺伝学的な機能障害は神経発達および神経変性の表現型と関連づけられており、高いプロテオスタシス需要をもつ長寿命細胞の維持にTECPR2が関与する可能性と整合します。そのためTECPR2は、ヒト細胞モデルにおけるオートファジー制御、細胞内輸送、ストレス応答経路の研究において重要な標的となります。

TECPR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTECPR2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TECPR2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TECPR2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TECPR2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TECPR2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TECPR2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TECPR2の機能に不可欠なTECPR2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TECPR2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TECPR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTECPR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TECPR2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TECPR2 HDRプラスミド（h）および TECPR2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTECPR2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTECPR2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。