TBZF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417474

Visão geral

ZNF675 codifica a proteína humana TBZF, um suposto fator de ligação ao DNA do tipo dedo de zinco implicado na regulação transcricional e na manutenção de programas de expressão gênica específicos do estado celular. Como um provável regulador nuclear, espera-se que o TBZF influencie processos associados à cromatina, como a atividade de promotores/realçadores (enhancers), a repressão ou ativação transcricional e a coordenação de redes gênicas a jusante responsivas à sinalização. A desregulação de fatores de transcrição do tipo dedo de zinco é frequentemente associada a alterações em vias de diferenciação, proliferação e resposta ao estresse, tornando o ZNF675 um alvo relevante para estudos mecanísticos do controle regulatório de genes em fenótipos celulares associados a doenças. Investigar a função do TBZF pode ajudar a esclarecer como os circuitos transcricionais se integram a vias mais amplas que governam a estabilidade do genoma e a homeostase celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TBZF (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ZNF675 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ZNF675, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ZNF675 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TBZF.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ZNF675 para a investigação da sinalização de TBZF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ZNF675 críticos para a função TBZF
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ZNF675 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TBZF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TBZF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ZNF675. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TBZF Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TBZF (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ZNF675 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ZNF675 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.