TARC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422837

Visão geral

Ccl17 codifica a quimiocina do timo e regulada por ativação (TARC/CCL17), uma quimiocina CC secretada que se liga ao CCR4 para direcionar a quimiotaxia de subpopulações de células T CCR4-positivas, incluindo células Th2 e células T reguladoras. Em tecidos imunes de camundongos, a TARC contribui para o tráfego de leucócitos, moldando a composição e a polarização dos infiltrados inflamatórios e coordenando respostas dependentes de antígeno. A expressão de Ccl17 é comumente induzida a jusante da sinalização por citocinas e da ativação de receptores de reconhecimento de padrões em compartimentos mieloides e estromais, conectando sinais inatos ao recrutamento de células adaptativas. A desregulação da sinalização Ccl17/TARC está associada à inflamação do tipo alérgico e à patologia imunomediada, tornando-a um ponto útil para estudar gradientes de quimiocinas, inflamação de barreira e a comunicação cruzada entre células T e mieloides.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TARC (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccl17 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccl17, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccl17 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TARC.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccl17 para a investigação da sinalização de TARC, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccl17 críticos para a função TARC
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccl17 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TARC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TARC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccl17. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TARC Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TARC (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccl17 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccl17 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.