Tafazzin Lentiviral Activation Particles (m): sc-426211-LAC

Das Mausgen **Taz** kodiert Tafazzin, eine mitochondriale Phospholipid-Transacylase, die Cardiolipin umgestaltet und damit die für eine optimale Organisation der inneren Mitochondrienmembran erforderliche Acylketten-Zusammensetzung prägt. Über die Reifung von Cardiolipin unterstützt Tafazzin die oxidative Phosphorylierung, die Stabilität von Atmungsketten-Superkomplexen sowie die mitochondriale Dynamik, die Apoptose, Mitophagie und die zelluläre Energiehomöostase beeinflusst. Eine dysregulierte Taz/Tafazzin-Funktion stört die mitochondriale Bioenergetik und das Redoxgleichgewicht und macht Taz zu einem zentralen mechanistischen Knotenpunkt für die Untersuchung cardiolipinabhängiger Signalwege in energieintensiven Geweben. Taz wird daher häufig in Modellen für Defekte des mitochondrialen Membran-Remodelings und damit verbundene Phänotypen metabolischen Stresses eingesetzt.

Tafazzin Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Taz-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Tafazzin Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Taz-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Tafazzin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Taz-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.