TADA2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406224

概要

TADA2B（transcriptional adaptor 2B）は、ヒストンアセチルトランスフェラーゼ複合体ATACの中核構成要素であり、ヒストンH3のアセチル化を促進してクロマチンのアクセス可能性を維持することで、転写開始を支えます。GCN5/KAT2Aおよび関連する共活性化因子モジュールとの相互作用を通じて、TADA2BはクロマチンリモデリングとRNAポリメラーゼII依存的な遺伝子発現プログラムを結び付けます。その機能は、細胞周期の進行、分化に伴う転写ネットワーク、ならびにゲノム全体にわたるエンハンサー機能の制御と関連しています。TADA2Bを含むATAC/GCN5軸の構成因子の制御異常は、がんや神経発達関連研究で観察される転写異常やエピジェネティック状態の乱れと関連づけられています。

TADA2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTADA2B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TADA2B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TADA2Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TADA2Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TADA2Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TADA2B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TADA2Bの機能に不可欠なTADA2Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TADA2Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TADA2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTADA2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TADA2B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TADA2B HDRプラスミド（h）および TADA2B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTADA2Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTADA2B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。