Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TADA2B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406224
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TADA2B El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TADA2B, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TADA2B Anticuerpo (MB-56): sc-130479
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TADA2B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406224 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TADA2B (adaptador transcripcional 2B) es un componente central del complejo ATAC de acetiltransferasa de histonas, que favorece el inicio de la transcripción al promover la acetilación de la histona H3 y mantener la cromatina accesible. A través de interacciones con GCN5/KAT2A y módulos coactivadores relacionados, TADA2B vincula la remodelación de la cromatina con programas de expresión génica dependientes de la ARN polimerasa II. Su actividad se asocia con la regulación de la progresión del ciclo celular, redes transcripcionales ligadas a la diferenciación y la función de potenciadores (enhancers) a escala genómica. La regulación alterada de componentes del eje ATAC/GCN5, incluido TADA2B, se ha relacionado con la transcripción desregulada y con estados epigenéticos anómalos observados en estudios sobre cáncer y neurodesarrollo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TADA2B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TADA2B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TADA2B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TADA2B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TADA2B.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TADA2B para la investigación de la señalización de TADA2B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TADA2B críticos para la función de TADA2B
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TADA2B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TADA2B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TADA2B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TADA2B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TADA2B (h) y el plásmido HDR TADA2B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TADA2B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TADA2B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.