T2R38 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402279

개요

TAS2R38는 쓴맛 수용체 T2R38을 암호화하며, T2R38은 PTC/PROP 같은 티오요소(thiourea) 함유 화합물을 감지하는 class A GPCR이다. 이 수용체는 화학감각 세포에서 gustducin 연관 신호전달과 결합해 Ca²⁺ 플럭스를 포함한 세포내 2차 전달자 신호를 조절한다. 구강의 미각 지각을 넘어, T2R38은 구강 외 상피에도 발현되며 쓴맛 수용체 신호전달은 화학감각적 감시와 상피 반응 조절에 기여한다. 흔한 TAS2R38 하플로타입은 수용체 민감도를 변화시키며, 쓴맛 지각과 화학감각에 의해 유도되는 행동의 개인차를 결정하는 유전적 요인으로 연구되어 왔다. GPCR과 연결된 감각 수용체로서 T2R38은 인간 세포 시스템에서 수용체 신호전달, 발현 조절, 유전형–표현형 관계를 분석하기 위한 다루기 쉬운(tractable) 모델을 제공한다.

T2R38 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TAS2R38 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TAS2R38 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TAS2R38의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 T2R38 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 T2R38 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TAS2R38 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• T2R38 기능에 중요한 TAS2R38 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TAS2R38 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• T2R38 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 T2R38 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TAS2R38 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  T2R38 HDR 플라스미드 (h) 및 T2R38 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TAS2R38 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TAS2R38 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.