Tβ-4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422497

개요

Tmsb4x는 티모신 β-4(Tβ-4)를 암호화하며, Tβ-4는 G-액틴의 가용성을 조절하고 세포골격의 역동적 재구성을 지원하는 고도로 보존된 액틴-격리(actin-sequestering) 펩타이드입니다. 마우스 세포에서 Tβ-4는 액틴 중합의 조절과, 포컬 어드히전 및 Rho 계열 GTPase 경로와 연계된 하위 신호전달을 통해 세포 이동, 부착, 상처 관련 운동성, 세포골격 조직화 등의 과정에 영향을 미칩니다. Tmsb4x는 액틴 의존적 수송과 세포 스트레스 반응을 형성함으로써 염증, 조직 재형성, 혈관신생 프로그램, 섬유화 진행과 같은 맥락에서 연구되어 왔습니다. 또한 Tβ-4 활성 변화와 연관된 액틴 역학의 이상 조절은 암 생물학 및 면역세포 기능과 관련된 증식 및 이동성 표현형에 영향을 줄 수 있습니다.

Tβ-4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tmsb4x 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tmsb4x 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tmsb4x의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Tβ-4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Tβ-4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tmsb4x 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Tβ-4 기능에 중요한 Tmsb4x 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tmsb4x 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Tβ-4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Tβ-4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tmsb4x 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Tβ-4 HDR 플라스미드 (m) 및 Tβ-4 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tmsb4x 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tmsb4x 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.