Plásmido Doble Nickase (h) Syntaxin 17: sc-403251-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Syntaxin 17 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Syntaxin 17 (h) y el plásmido de doble nickasa Syntaxin 17 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a STX17. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Syntaxin 17 Anticuerpo (A-11): sc-518187
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Syntaxin 17 | sc-403251-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Syntaxin 17 | sc-403251-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STX17 codifica la sintaxina 17, un SNARE anclado al retículo endoplásmico (RE) que se localiza en las membranas asociadas a mitocondrias y en los autofagosomas, donde media la autofagia en etapas tardías al promover la fusión autofagosoma–lisosoma. A través de interacciones con SNAP29 y VAMP8, STX17 sostiene el flujo autofágico, el control de calidad de orgánulos y la adaptación celular al estrés por falta de nutrientes, con efectos posteriores sobre la homeostasis mitocondrial y la señalización inmunitaria innata. La alteración del tráfico y la autofagia dependientes de STX17 se ha vinculado con cambios en la mitofagia y con un desequilibrio de la proteostasis, procesos relevantes para la neurodegeneración, la tolerancia de las células cancerosas al estrés y fenotipos inflamatorios. Como nodo en la interfaz entre la fusión de membranas y la autofagia selectiva, STX17 se estudia con frecuencia en vías que regulan la función lisosomal, el recambio mitocondrial y la supervivencia celular bajo estrés.
Syntaxin 17 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus STX17 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de STX17. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de STX17. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con STX17 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.