Syntaxin 10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406240

概要

STX10は、主にトランスゴルジネットワークおよびエンドソーム膜に局在し、小胞のドッキングと膜融合を制御するt-SNAREタンパク質であるSyntaxin 10をコードします。Syntaxin 10は他のSNARE構成因子やテザリング因子との相互作用を介して、エンドソームからゴルジ体への回収（リトリーバル）やゴルジ体以降の輸送を制御し、受容体リサイクリング、リソソーム関連輸送、ならびに分泌経路全体の恒常性維持を支えます。STX10依存的な輸送が破綻すると、カーゴの仕分けやオルガネラ動態が変化し、これらの過程は免疫シグナル伝達、神経生物学、細胞ストレス応答にしばしば関与するとされています。SNARE機構に関わる小胞輸送プログラムの変化は、モデル系において炎症の制御異常や神経発生機能障害など、疾患に関連する表現型と関連づけられています。

Syntaxin 10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSTX10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、STX10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、STX10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Syntaxin 10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Syntaxin 10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、STX10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Syntaxin 10の機能に不可欠なSTX10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、STX10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Syntaxin 10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSyntaxin 10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、STX10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Syntaxin 10 HDRプラスミド（h）および Syntaxin 10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSTX10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSTX10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。