Synaptogyrin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423240

概要

Syngr3は、シナプトジャイリン3（synaptogyrin-3）をコードしており、これはシナプス小胞膜に存在する4回膜貫通型タンパク質で、主にシナプス前終末に豊富に発現し、小胞輸送および神経伝達物質放出の動態に寄与します。シナプトジャイリン3は、調節性エキソサイトーシスとエンドサイトーシス後のリサイクリング過程に関与し、シナプス伝達や可塑性を形成するうえで、中核的なシナプス小胞サイクル機構と連携します。シナプトジャイリンファミリーの機能異常は、神経回路活動やシナプス恒常性の破綻と関連づけられており、Syngr3は神経発達および神経変性の機序研究において重要な対象となります。マウスモデルでは、Syngr3の改変は、回路レベルの表現型や活動依存性シグナル伝達に対するシナプス前要素の寄与を解明するのに有用です。

Synaptogyrin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSyngr3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Syngr3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Syngr3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Synaptogyrin-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Synaptogyrin-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Syngr3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Synaptogyrin-3の機能に不可欠なSyngr3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Syngr3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Synaptogyrin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSynaptogyrin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Syngr3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Synaptogyrin-3 HDRプラスミド（m）および Synaptogyrin-3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSyngr3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSyngr3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。