Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423239

概要

Syngr2は、シナプトジャイリン2（synaptogyrin-2）をコードする遺伝子であり、プレシナプス終末に豊富に存在する4回膜貫通型のシナプス小胞膜タンパク質です。小胞の構造・配置の維持や神経伝達物質放出のダイナミクスに寄与します。シナプトジャイリン2はシナプス小胞サイクルに関与し、エキソサイトーシス／エンドサイトーシスの共役や、神経細胞および神経内分泌細胞における小胞輸送に影響を与えます。小胞の利用可能性や放出確率の調節を通じて、SYNG2に関連する機構はシナプス可塑性や神経回路機能の研究において重要です。プレシナプスでの小胞取り扱いの異常は、神経発達障害や神経変性疾患のモデルで繰り返し見られる特徴であるため、Syngr2はシナプス機能障害の機構解明に向けた有用な標的となります。

Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSyngr2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Syngr2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Syngr2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Synaptogyrin-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Synaptogyrin-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Syngr2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Synaptogyrin-2の機能に不可欠なSyngr2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Syngr2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSynaptogyrin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Syngr2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Synaptogyrin-2 HDRプラスミド（m）および Synaptogyrin-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSyngr2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSyngr2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。