SUV420H2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404626

Visão geral

KMT5C codifica a metiltransferase de lisina SUV420H2, uma enzima modificadora da cromatina que catalisa a trimetilação da lisina 20 da histona H4 (H4K20me3). Essa marca é enriquecida na heterocromatina e favorece a compactação da cromatina em níveis superiores, o controle do tempo de replicação e a manutenção da estabilidade do genoma por meio da regulação da escolha de vias de reparo do DNA. A atividade da SUV420H2 se integra a programas de silenciamento epigenético e à remodelação da cromatina associada ao ciclo celular, influenciando a repressão transcricional em elementos repetitivos e em loci específicos de linhagem. A desregulação dos padrões de metilação de H4K20 e alterações na expressão de SUV420H2 têm sido associadas a estados aberrantes de cromatina observados no câncer e em outros contextos de instabilidade genômica, tornando o KMT5C um alvo útil para estudos mecanísticos com foco em epigenética.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SUV420H2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KMT5C em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KMT5C, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KMT5C na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SUV420H2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KMT5C para a investigação da sinalização de SUV420H2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KMT5C críticos para a função SUV420H2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KMT5C para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SUV420H2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SUV420H2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KMT5C. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SUV420H2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SUV420H2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KMT5C para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KMT5C definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.