Plásmido CRISPR de Activación (m) SUV39H1: sc-423224-ACT

El gen murino **Suv39h1** codifica **SUV39H1**, una metiltransferasa de histonas con dominio SET que cataliza la trimetilación de H3K9 para promover la formación de heterocromatina y la represión transcripcional. SUV39H1 coopera con las proteínas HP1 y con la maquinaria de metilación del ADN para estabilizar el silenciamiento epigenético en las repeticiones pericentroméricas, regular la integridad del genoma y garantizar la segregación cromosómica adecuada. Mediante el control de la compactación de la cromatina, SUV39H1 influye en la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y los programas génicos específicos de linaje. La actividad desregulada de SUV39H1 y las alteraciones del paisaje de H3K9me3 se han vinculado con estados transcripcionales aberrantes observados en biología del cáncer, senescencia y modelos de enfermedades neurológicas, lo que convierte a **Suv39h1** en un objetivo frecuente de la investigación epigenética y de cromatina.

SUV39H1 El plásmido de activación CRISPR (m) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de Suv39h1 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

SUV39H1 El plásmido de activación CRISPR (m) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus Suv39h1 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional Suv39h1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de SUV39H1. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo Suv39h1 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de SUV39H1 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía SUV39H1 en células tumorales con expresión de Suv39h1 silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.