SUV39H1 Plasmídeo de ativação de CRISPR (m): sc-423224-ACT

O gene **Suv39h1** de camundongo codifica a **SUV39H1**, uma metiltransferase de histonas com domínio SET que catalisa a trimetilação de **H3K9**, promovendo a formação de heterocromatina e a repressão transcricional. A SUV39H1 coopera com proteínas **HP1** e com a maquinaria de metilação do DNA para estabilizar o silenciamento epigenético em repetições pericentroméricas, regular a integridade do genoma e assegurar a segregação cromossômica adequada. Por meio do controle da compactação da cromatina, a SUV39H1 influencia a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e programas gênicos específicos de linhagem. A atividade desregulada da SUV39H1 e alterações nas paisagens de **H3K9me3** têm sido associadas a estados transcricionais aberrantes observados na biologia do câncer, na senescência e em modelos de doenças neurológicas, tornando **Suv39h1** um alvo frequente em pesquisas de epigenética e cromatina.

SUV39H1 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de Suv39h1 sem alterar a sequência de ADN subjacente.

SUV39H1 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus Suv39h1 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição Suv39h1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de SUV39H1. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus Suv39h1 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de SUV39H1 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via SUV39H1 em células tumorais com expressão de Suv39h1 silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.